Një mikroskop fluoreshent është një lloj mikroskopi optik që përdor një burim drite me intensitet të lartë për të ndriçuar mostrën dhe për të eksituar fluorokromet në mostër. Ndriçimi i ekzemplarit zakonisht bëhet me një burim drite që lëshon dritë ultravjollcë. Ato përdoren gjerësisht në fushat biologjike, mjekësore dhe industriale.
Si funksionon një mikroskop fluoreshent?
Një mikroskop fluoreshent përdor një llambë merkuri ose ksenon për të prodhuar dritë ultravjollcë. Drita hyn në mikroskop dhe godet një pasqyrë dykroike - një pasqyrë që reflekton një varg gjatësi vale dhe lejon një gamë tjetër të kalojë. Pasqyra dykroike reflekton dritën ultravjollcë deri në ekzemplar. Disa ekzemplarë fluoreshenojnë natyrshëm nën dritën ultravjollcë, sepse ato përmbajnë substanca fluoreshente si klorofili. Nëse ekzemplari që do të shikohet nuk fluoreshenon natyrshëm, ai mund të ngjyroset me ngjyra fluoreshente të quajtura fluorokrome.
Nga se përbëhet një mikroskop fluoreshent?
1. Burimi i dritës
Burimet më të zakonshme të dritës janë merkuri, ksenoni dhe LED. Mërkuri siguron cilësinë më të mirë të dritës për mikroskopin fluoreshent. LED-et po bëhen më të njohura sepse janë më pak të kushtueshme se burimet e tjera dhe konsumojnë më pak energji.
| Llambë Merkuri | Llambë ksenon | LED | |
| Gjatësia e valës së dritës së emetuar | 350-370 nm | 400 nm ~ 450 nm | 400-700 nm |
| Jetëgjatësia (orë) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Avantazhi | 1. Drita me intensitet të lartë, burimet më të zakonshme të dritës. 2. Lëshon ultravjollcë të fortë dhe blu-vjollcë për të ngacmuar të gjitha llojet e fluoroforeve. 3. Imazhe të ndritshme dhe shumëngjyrëshe. | 1. Intensiteti spektral është i qëndrueshëm. 2. Intensitet i fortë spektral në infra të kuqe dhe infra të kuqe të mesme. | 1. Lehtë për t'u zëvendësuar. 2. Nuk ka nevojë të ngroheni. 3. Mund të ndizet dhe fiket menjëherë. 4. Kontrolloni intensitetin e burimit të dritës. |
| Disavantazhi | 1. Një jetë e shkurtër. 2. Koha e gjatë e ngrohjes. | 1. Kutia speciale e tensionit të ulët DC kërkohet për nxehtësinë e tepërt. 2. Më e shtrenjtë se llamba e merkurit | 1. Drita UV është më e dobët se llamba e merkurit. 2. Çdo gjatësi vale e dritës kërkon një LED të veçantë për shkak të gjerësisë së brezit të ngushtë që lëshojnë. |
Shtojcë fluoreshente e merkurit
Shtojcë LED fluoreshente
2. Filtri i ngacmimit
Filtri i ngacmimit është thelbësor për funksionimin e një mikroskopi fluoreshent. Ai kalon dritën e një gjatësi vale më të shkurtër, të cilën boja fluoreshente mund ta thithë. Gjithashtu, bllokon burimet e tjera të dritës emocionuese.
Filtri i ngacmimit (B, G, U, V)
3. Pasqyrë dykroike
Pasqyra dikroike është një lloj filtri optik që reflekton dritën në gjatësi vale të caktuara ndërsa transmeton të tjera. Përdoret në mikroskopët fluoreshent për të ndarë gjatësinë e valës së ngacmimit dhe emetimit.
4. Filtri i emisioneve
Filtri i emetimit kalon vetëm gjatësitë e valëve të emetuara nga fluorofori dhe bllokon të gjithë dritën e padëshiruar jashtë këtij brezi - veçanërisht gjatësitë e valëve të ngacmimit.
5. Ngjyra fluoreshente
Ngjyrat fluoreshente janë komponime organike që posedojnë një veti të fluoreshencës, me anë të së cilës ato mund të formojnë një imazh fluoreshent duke emetuar dritë jeshile të dukshme me kontrast të lartë pasi të ngacmohen nga drita ultravjollcë shumë ndriçuese. Ngjyrat fluoreshente të përdorura zakonisht janë; DAPI (49,6-diamidino-2-fenilindol), akridine portokalli, auramine-rodamine, Alexa Fluors ose DyLight 488.
Sa lloje të mikroskopëve fluoreshent?
1. Mikroskopi i drejtë epifluoreshent:
Është lloji më i zakonshëm i mikroskopit fluoreshent. Ngacmimi i fluoroforit dhe zbulimi i fluoreshencës bëhen përmes së njëjtës rrugë drite (pra përmes objektivit). Shumica e mikroskopëve fluoreshent, veçanërisht ato të përdorura në shkencat e jetës, janë të dizajnit të epifluoreshencës.
BS-2081F Mikroskopi Biologjik Fluoreshent Kërkimor
2. Mikroskopi fluoreshent konfokal:
Mikroskopi fluoreshent konfokal: Ky lloj mikroskopi fluoreshent kombinon skanimin me lazer me ndriçimin fluoreshent për të prodhuar një imazh. Mund të përdoret në një gamë të gjerë aplikimesh, të tilla si studimi i qelizave dhe indeve, zbulimi i proteinave dhe substancave të tjera brenda qelizave dhe matja e trashësisë së materialeve.
BS-2081F Mikroskopi Biologjik Fluoreshent Kërkimor
3. Mikroskopi me fluoreshencë të përmbysur
Burimi i dritës dhe kondensuesi i këtij lloji mikroskopi janë të vendosura në majë, të kthyera nga poshtë. Këndi i ndriçimit duhet të jetë 90 gradë në lidhje me sipërfaqen e ekzemplarit që ekzaminohet.
BS-2095F Mikroskopi fluoreshent i përmbysur
Cilat janë avantazhet dhe disavantazhet e mikroskopëve fluoreshent?
Përparësitë:
- Mundëson vëzhgimin e qelizave në organizmat e gjallë pa i dëmtuar ato
- Ofron imazhe me rezolucion të lartë me ngjyra të sakta
- Lejon studimin e proceseve të gjalla në qeliza
- Të përdoret për të identifikuar lloje të ndryshme të molekulave brenda qelizave, të tilla si proteinat ose acidet nukleike.
Disavantazhet:
-Lejon vetëm vëzhgimin e strukturave specifike brenda një qelize të etiketuar me ngjyrën fluoreshente.
-Fotozbardhja për shkak të ngacmimit të elektroneve gjatë procesit të fluoreshencës mund të ndikojë në molekulat reaktive të ngjyrave fluoreshente. Si rezultat, ngjyrat reaktive mund të humbasin vetinë e tyre kimike të intensitetit të emetimit të fluoreshencës.
- Qelizat janë të ndjeshme ndaj efektit fototoksik pas ngjyrosjes me ngjyra fluoreshente, pasi molekulat fluorofore thithin fotonet me energji të lartë nga drita me gjatësi vale të shkurtër.
Cilat janë aplikimet e një mikroskopi fluoreshent?
Mikroskopët fluoreshent përdoren gjerësisht në fusha të ndryshme kërkimi dhe aplikimi, duke përfshirë biokiminë, biologjinë qelizore, mikrobiologjinë, imunologjinë dhe mjekësinë.
1. Në fushën e biologjisë, mikroskopi fluoreshent mundëson identifikimin e saktë dhe të detajuar të komponentëve dhe aktiviteteve qelizore qelizore dhe nënmikroskopike me ndihmën e etiketimit me ngjyra fluoreshente.
2. Në fushën mjekësore, mikroskopi fluoreshent mund të përdorë reagentë fluoreshentë për të zbuluar praninë dhe shpërndarjen e baktereve dhe viruseve, ose për të ndihmuar në etiketimin e objektivave kirurgjikale për të lehtësuar operacionin.
3. Në fushën e mineralogjisë, mikroskopi fluoreshent përdoret shpesh për të studiuar substanca me veti spontane fluoreshence, si asfalti, nafta, qymyri, oksidi i grafenit dhe minerale të tjera.
4. Në shkencën e materialeve, mikroskopi fluoreshent mund të përdoret në industrinë e tekstilit ose në industrinë e letrës për të analizuar materialet me bazë fibrash.
Koha e postimit: Mar-14-2023